半边旗中二萜类化合物5F诱导胰腺癌细胞凋亡机制的探讨

作者： 沈仕兴 [1] ; 张科郡 [2] ; 刘群声 [2] ; 谷水基 [2] ; 许海博 [2]

摘要：目的：观察研究半边旗中二萜类化合物5F（11a-羟基-15-氧-16-烯-ent贝壳杉烷-19酸）诱导人胰腺癌细胞株AsPC-1凋亡的效果及其机制。方法：用脂质体转染法将PUMA／siRNA导入AsPC-1细胞，G418筛选阳性细胞，获得稳定转染的阳性克隆。将转染载体的AsPC-1阳性克隆细胞和未转染载体的AsPC-1细胞分别暴露于浓度为8．875μmol·L^-1、37．5μmol·L^-1、142μmol·L^-1的5F中作用72h。RT—PCR检测不同组细胞经5F作用24h后的PUMA表达；MTF检测细胞生长抑制，流式细胞仪（FCM）检测细胞凋亡，Hoechst33258和PI双染色染色了解细胞凋亡的变化。结果：5F促进AsPC-1细胞凋亡，抑制细胞生长，并有明显的剂量依赖性，在细胞凋亡的同时伴有PUMA表达的上调；当PUMA表达抑制后，受5F作用的细胞出现PuMA表达的降低，同时伴有细胞凋亡的抑制及细胞的明显增殖。结论：5F促进体外AsPC—1细胞凋亡，并抑制其生长，其诱导凋亡与上调PUMA有关。

关键字： 胰腺癌 半边旗 二萜类 PUMA基因 转染 凋亡

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