大青叶及其混淆品的ITS2序列鉴定研究

作者： 孙稚颖 [1,2] ; 罗红梅 [1] ; 陈士林 [1]

摘要：目的：对中药材大青叶及其混淆品进行分子鉴定，以确保该药材的质量以及临床疗效。方法：采用PCR直接测序法，测定核基因ITS2区，所得序列经CodonCode Aligner拼接后，用软件MEGA4．0进行相关数据分析，构建NJ（邻接）树，并利用Koetschan等建立的ITS2数据库及其网站预测ITS2二级结构。结果：大青叶基源植物菘蓝ITS2序列长度为191bp，其种内平均K2P遗传距离（0．002）远小于其与混淆品的种间平均K2P遗传距离（0．882）；由所构建的系统聚类树图可以看出，各物种均表现出了单系性，而同时又与其它物种明显区分开；比较ITS2二级结构发现，各物种在4个螺旋区的茎环数目、大小、位置以及螺旋发出时的角度均有明显差异。结论：ITS2作为条形码可以方便快捷的鉴别大青叶正品及其混淆品，对药典中其它药材的相关研究也具有重要的参考价值。

关键字： 大青叶 DNA条形码 ITS2 分子鉴定

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