基于ITS2序列鉴定苗药金铁锁及其混伪品

作者： 宋明 [1] ; 张婉冰 [1] ; 张雅琴 [1] ; 孙伟 [2] ; 向丽 [2] ; 石晋丽 [3] ; 马孝熙 [1] ; 王俊 [1] ; 樊佳佳 [1] ; 张晓存 [1] ; 刘霞 [1,2]

摘要：目的：本研究利用ITS2序列对苗药金铁锁及其混伪品进行鉴定研究，从而确保药材质量，保障临床用药安全。方法：提取金铁锁药材及其混伪品基因组DNA，PCR扩增并双向测序获得ITS2序列。所有序列经过CodonCode Aligner V3.7.1拼接后，采用MEGA5.1软件进行序列比对，计算种内和种间Kimura 2-Parameter（K2P）遗传距离，并构建系统发育树。采用相似性搜索法、最近距离法、邻接（NJ）树法对ITS2序列鉴定能力进行评估。结果：金铁锁药材的ITS2序列长度为229bp，其ITS2序列种内最大K2P遗传距离小于与混伪品的最小种间K2P遗传距离；应用相似性搜索法表明ITS2序列能够准确鉴定金铁锁药材及其混伪品；基于ITS2序列构建NJ树，金铁锁及其混伪品均表现出良好单系性，均能明显区分。结论：ITS2序列能够稳定、准确地鉴定金铁锁药材及其混伪品，DNA条形码技术可为金铁锁药材及其混伪品的鉴定提供新的方法。

关键字： 金铁锁 ITS2 鉴定 混伪品

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