加参方对TGF-β1诱导的大鼠心肌成纤维细胞的细胞增殖、胶原分泌及分化的实验研究

作者： 于瑞 [1,2] ; 崔琳 [1] ; 王幼平 [1] ; 李彬 [1] ; 王新陆 [1,2] ; 谢世阳 [1] ; 高原 [1] ; 朱明军 [1,2]

摘要：目的：研究加参方对转化生长因子β1（Transforming Growth Factor-β1,TGF-β1）诱导的大鼠心肌成纤维细胞的细胞增殖、胶原分泌及分化的影响,同时对其机制进行初步探讨。方法：出生1-3天的SD大鼠,无菌条件下取出心脏,胰酶消化心肌组织,分离心肌成纤维细胞（Cardiac Fibroblasts,CFs）。采用10 ng·m L-1浓度的TGF-β1诱导CFs,0.25 mg·m L-1浓度的加参方药液作用于CFs 24 h。采用CCK-8计数法检测加参方对CFs细胞增殖的影响;免疫荧光法检测加参方对CFsα-平滑肌肌动蛋白（α-Smooth Muscle Actin,α-SMA）及Ⅰ型胶原的影响;羟脯氨酸测定法检测加参方对CFs胶原分泌的影响;实时荧光定量PCR（Real Time-PCR,RT-PCR）检测加参方对CFs Smad2、Smad3 m RNA表达的影响;蛋白印迹法（Western blot）检测加参方对CFs磷酸化Smad2、磷酸化Smad3（Phosphorylated-Smad2/3,P-Smad2/3）蛋白表达的影响。结果：与模型组相比,加参方可明显抑制CFs的细胞增殖（P〈0.05）,降低α-SMA及Ⅰ型胶原的表达量（P〈0.05）,减少CFs的胶原分泌（P〈0.05）。同时,加参方组Smad2、Smad3 m RNA较模型组明显下调（P〈0.05）,P-Smad2、P-Smad3蛋白表达量也明显下降（P〈0.05）。结论：加参方对TGF-β1诱导的大鼠心肌成纤维细胞的细胞增殖、胶原分泌及向肌成纤维细胞的分化具有抑制作用,这可能与加参方抑制TGF-β1/Smads信号通路的激活有关。

关键字： 加参方 心肌成纤维细胞 TGF-β1 细胞增殖 胶原含量 TGF-β1Smads信号通路

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