天麻破壁粉、冻干粉对戊四唑诱导癫痫大鼠海马组织Bcl-2、Bax、Caspase-3、GAT-1mRNA及蛋白表达对比研究

作者：刘春艳 柴艺汇 田兴中 唐靖雯 卢礼平 谢宇 周雯 牛建均 陈露露 张丽艳 茅向军

摘要：目的通过研究天麻（普通粉、破壁粉、冻干粉）对戊四唑诱导癫痫大鼠海马组织B细胞白血病-淋巴瘤-2基因（B-cell leukemia-iymphoma-2,Bcl-2）,B细胞白血病淋巴瘤相关蛋白基因（Bcl-2-associated X protein gene,Bax）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）和γ-氨基丁酸转运体1（GAT-1）基因和蛋白的表达影响对神经保护作用机制进行初步探讨,并对三种加工方式的天麻药效差异性药效进行对比研究。方法以SD大鼠为研究对象,建立戊四唑癫痫模型。随机分为12组,正常组,模型组,丙戊酸钠组,天麻（普通粉、破壁粉、冻干粉）分别对应的低、中、高剂量组（0.5、1.0、2.0 g·kg-1）连续灌胃10 d。用荧光定量聚合酶链式反应法（Real-time PCR）检测三种加工方式的天麻对戊四唑诱导癫痫海马组织Bcl-2、Bax、Caspase-3和GAT-1基因表达的情况;用蛋白免疫印迹法（Western Blot）检测天麻对戊四唑诱导癫痫海马组织Bax、Bcl-2、Caspase-3和GAT-1蛋白表达情况。结果模型组癫痫发作强度均为Ⅵ级,表明造模成功。与模型组比较,丙戊酸钠组及天麻普通粉、破壁粉、冻干粉各剂量组癫痫潜伏时间显著延长（P <0.05）,癫痫持续时间显著缩短（P <0.05）。与丙戊酸钠组比较,天麻普通粉高剂量组、天麻破壁粉高剂量组癫痫潜伏时间无显著差异（P <0.05）,而天麻冻干粉高剂量组癫痫潜伏时间显著延长（P <0.05）,且持续时间与之无显著性差异（P <0.05）。与正常组比较,模型组Bax、Caspase3和GAT-1mRNA及蛋白相对表达量显著升高（P <0.05）,Bcl-2 mRNA及蛋白相对表达量显著下降（P <0.05）;与模型组比较,丙戊酸钠组和天麻各组可显著降低Bax、Caspase3和GAT-1 mRNA及蛋白相对表达量（P <0.05）,显著升高Bcl-2 mRNA及蛋白相对表达量（P <0.05）。结论天麻冻干粉高剂量组效果最佳,天麻破壁粉高剂量组次之,最后天麻普通粉高剂量组。天麻对神经的保护具有剂量依赖性,并与天麻不同加工方式相关,其作用机制与调节Bcl-2、Bax、Caspase-3和GAT-1mRNA及蛋白表达水平有关。

关键字：天麻;癫痫;冻干粉;Bcl-2;Caspase-3;Bax;GAT-1;

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